Proovi ettevalmistamine jaLaadimine
Kuna enamikul juhtudel kasutatakse pidevat puhversüsteemi ilma virnastamata geelita, peaksid proovid olema sobiva kontsentratsiooniga ja väikese mahuga. Kasutage apipetigaproovi aeglaselt lisada, 5–10 μg süvendi kohta, et vältida eraldusvõime olulist vähenemist. Millalproovi laadimine, tuleb toide välja lülitada. Proov peaks sisaldama indikaatorvärvi (0,025% bromofenoolsinist või oranži) ja sahharoosi (10-15%) või glütserooli (5-10%), et suurendada selle tihedust, kontsentreerida proov ja vältida difusiooni. Kuid mõnikord võivad sahharoos või glütserool põhjustada elektroforeesi tulemustes U-kujulisi ribasid, mida saab vältida 2,5% Ficolli (polüvinüülpürrolidooni) kasutamisega.
Elektroforees
Elektroforeesi pinge on 5-15 V/cm, üldiselt umbes 10 V/cm. Suurte molekulide eraldamiseks peaks pinge olema madalam, tavaliselt mitte üle 5 V/cm.
Värvimine
Fluorestsentsvärvi etiidiumbromiidi (EB) kasutatakse tavaliselt värvimiseks, et jälgida DNA ribasid agaroosgeelis. EB võib sisestada DNA molekulide aluspaaride vahele, põhjustades EB DNA-ga seondumise. 260 nm ultraviolettkiirguse neeldumine DNA poolt kantakse üle EB-le ja seotud EB kiirgab fluorestsentsi 590 nm juures nähtava valguse spektri punakasoranžis piirkonnas. Geeli värvimine 1 mmol/L MgSO4 lahuses 1 tunni jooksul võib vähendada seondumata EB põhjustatud taustafluorestsentsi, hõlbustades väikeste DNA koguste tuvastamist.
EB-värvil on mitmeid eeliseid: seda on lihtne kasutada, see ei lõhu nukleiinhappeid, on kõrge tundlikkusega ning võib värvida nii DNA-d kui RNA-d. EB-d saab proovile lisada ja UV-kiirguse neeldumise abil igal ajal jälgida. Pärast värvimist saab EB eemaldada n-butanooliga ekstraheerimisega.
EB-värv on aga tugev mutageen ja selle käitlemisel tuleb järgida ettevaatusabinõusid, näiteks kanda polüetüleenkindaid. Akridiinoranž on samuti sageli kasutatav värvaine, kuna see suudab eristada üheahelalisi ja kaheahelalisi nukleiinhappeid (DNA, RNA). Sellel on kaheahelaliste nukleiinhapete puhul roheline fluorestsents (530 nm) ja üheahelaliste nukleiinhapete puhul punane fluorestsents (640 nm). Lisaks võib värvimiseks kasutada muid värvaineid, nagu metüleensinine, metüleenroheline ja kinoliin B.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) on rohkem kui 50 aastat spetsialiseerunud elektroforeesiinstrumentide tootmisele koos meie professionaalse tehnilise meeskonna ning uurimis- ja arenduskeskusega. Meil on usaldusväärne ja terviklik tootmisliin projekteerimisest ülevaatuseni ja ladu ning turundustugi. Meie peamised tooted on elektroforeesielement (paak/kamber), elektroforeesi toiteallikas, sinine LED-transilluminaator, UV-transilluminaator, geelpildi- ja analüüsisüsteem jne.
Otsime nüüd koostööpartnereid, oodatud on nii OEM elektroforeesipaak kui ka edasimüüjad.
Kui teil on meie toodete ostuplaan, võtke meiega kindlasti ühendust. Võite saata meile sõnumi e-posti aadressile[e-postiga kaitstud]või[e-postiga kaitstud], või helistage meile numbril +86 15810650221 või lisage Whatsapp +86 15810650221 või Wechat: 15810650221.
Whatsappis või WeChatis lisamiseks skannige QR-kood.
Postitusaeg: 20. detsember 2023