Geelelektroforees on üks peamisi meetodeid, mida molekulaarbioloogias kasutatakse DNA analüüsimiseks. See meetod hõlmab DNA fragmentide migratsiooni läbi geeli, kus need eraldatakse suuruse või kuju alusel. Siiski, kas olete kunagi elektroforeesikatsete ajal esinenud vigu, näiteks määrdunud ribasid agaroosgeelil või geelil puuduvad triibud? Mis võiks olla nende vigade põhjuseks?
Meie tehnikud on siin teile viitamiseks koostanud paari veaotsingu kokkuvõtte.
1. Agaroosgeelile määritud ribad
●DNA lagunes. Vältige nukleaasiga saastumist.
● Elektroforeesi puhver ei ole värske. Pärast elektroforeesipuhvri korduvat kasutamist ioontugevus väheneb ja selle pH väärtus tõuseb, mistõttu puhvri maht nõrgeneb, mis mõjutab elektroforeesi efekti. Soovitatav on elektroforeesipuhvrit sageli vahetada.
● Kasutati sobimatuid elektroforeesi tingimusi. Ärge laske pingel ületada 20 V/cm ja hoidke elektroforeesi ajal temperatuuri <30 °C. Hiiglasliku DNA ahela elektroforeesi jaoks peaks temperatuur olema <15 °C. Kontrollige, kas elektroforeesipuhvris on piisavalt puhvermahtu.
● Geelile oli laaditud liiga palju DNA-d. Vähendage DNA kogust.
● DNA-s on liiga palju soola. Liigsete soolade eemaldamiseks kasutage edasijõudnutel etanoolisadestamist.
● DNA oli saastunud valguga. Kasutage valgu eemaldamiseks edasijõudnutele fenoolekstraktsioone.
● DNA denatureeriti. Ärge soojendage enne elektroforeesi. Lahjendage DNA puhvris 20 mM NaCl-ga.
2. Anomaaliad DNA ribade migratsioon
● λHind III fragmendi COS-saidi renatureerimine. Kuumutage DNA-d 5 minutit temperatuuril 65 °C enne elektroforeesi ja seejärel jahutage seda 5 minutit jääseadmel.
● Kasutati sobimatuid elektroforeesi tingimusi. Ärge laske pingel ületada 20 V/cm ja hoidke elektroforeesi ajal temperatuuri <30 °C. Kontrollige, kas elektroforeesipuhvris on piisavalt puhvermahtu.
● DNA denatureeriti. Ärge soojendage enne elektroforeesi. Lahjendage DNA puhvris 20 mM NaCl-ga.
3. Nõrgad või puuduvad DNA ribad agaroosgeelil
● Geelile laetud DNA ebapiisav kogus või kontsentratsioon. Suurendage DNA kogust. Polüakrüülamiidgeelelektroforees on veidi tundlikum kui agarooselektroforees ja proovi koormust saab vastavalt vähendada.
● DNA lagunes. Vältige nukleaasiga saastumist.
● DNA elektroforeesiti geelilt. Elektroforeerige geeli vähem aega, kasutage madalamat pinget või kasutage suuremat protsenti geeli.
● Etiidiumbromiidiga värvitud DNA visualiseerimiseks kasutati valet W-valgusallikat. Suurema tundlikkuse saavutamiseks kasutage lühilainepikkusega (254 nm) W valgust.
4. Puuduvad DNA ribad
●Väikese suurusega DNA eemaldati geelist elektroforeesiga. Elektroforeerige geeli vähem aega, kasutage madalamat pinget või kasutage suurema protsendi geeli.
● Sarnaste molekulide DNA ribasid on raske eristada. Suurendage elektroforeesi aega ja kontrollige kontsentratsioonigeelist, et veenduda, et geeli kasutatakse õigesti.
● DNA denatureeriti. Ärge soojendage enne elektroforeesi. Lahjendage DNA puhvris 20 mM NaCl-ga.
● DNA ahelad on tohutud ja tavapärane geelelektroforees ei sobi. Analüüsige impulssgeelelektroforeesi.Milliseid muid probleeme on teil agaroosgeelelektroforeesiga esinenud? Tulevikus uurime juhendeid rohkem.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) on spetsialiseerunud ettevõte, mis keskendub elektroforeesiga seotud toodetele Hiinas. Selle lugu algab 1970. aastal, kui Hiina ei olnud veel reformi ja avamisaega alustanud. Aastatepikkuse arengu kaudu on Liuyi Bitotechil oma kaubamärk, mida tuntakse elektroforeesitoodete siseturul Liuyi kaubamärgina.
Liuyi kaubamärgil on Hiinas enam kui 50-aastane ajalugu ning ettevõte suudab pakkuda stabiilseid ja kvaliteetseid tooteid kogu maailmas. Läbi aastatepikkuse arengu on see teie valikut väärt!
Liuyi Biotechi horisontaalsed elektroforeesielemendid (paagid/kambrid) on kvaliteetsed ja hea välimusega. Erineva suurusega geelialused vastavad teie erinevatele katsenõuetele. Meil on oma tehniline meeskond ja tehas. Kogu protsessi saame juhtida alates projekteerimisest kuni valmistamiseni, toorainest kuni põhiosadeni. DYCP 31 seeria on mõeldud DNA elektroforeesi jaoks, mis on mudelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DNjaDYCP-31E. Erinevused nende vahel on geeli suurused ja hind. Pakume oma klientidele täissuuruses tooteid. MudelDYCP-32Csaab teha suurima geeli 250mm * 250mm.
Vahepeal soovitame kasutada meie elektroforeesi toiteallikatDYY-6C,DYY-6DjaDYY-10Cmeie elektroforeesirakkude (paagid/kambrid) DYCP-31 ja 32 seeria jaoks.
Kui soovite toodete kohta lisateavet, külastage lisateabe saamiseks seda veebisaiti ja võtke meiega e-posti teel ühendust, et anda meile teada, mida soovite, ja vaadata, kas saame teile lahendusi pakkuda.
Meie kohta lisateabe saamiseks võtke meiega ühendust e-posti teel[e-postiga kaitstud], [e-postiga kaitstud].
Postitusaeg: mai-09-2022