Geelelektroforeesi optimeerimine: proovi mahu, pinge ja ajastuse parimad tavad

Sissejuhatus

Geelelektroforees on molekulaarbioloogia põhimeetod, mida kasutatakse laialdaselt valkude, nukleiinhapete ja muude makromolekulide eraldamiseks. Proovi mahu, pinge ja elektroforeesi aja nõuetekohane juhtimine on täpsete ja reprodutseeritavate tulemuste saavutamiseks ülioluline.Meie laborikolleeg pakubparimad tavad nende parameetrite haldamiseks SDS-PAGE geelelektroforeesi ajal.

3

Pekingi Liuyi Biotechnology geelelektroforeesi tooted

Näidismaht: järjepidevuse tagamine

SDS-PAGE elektroforeesi tegemisel on proovi maht võtmetegur, mis võib teie tulemuste eraldusvõimet oluliselt mõjutada. Üldiselt on soovitatav laadida 10 µL üldvalku süvendisse. Järjepidevuse tagamiseks ja proovide difusiooni vältimiseks külgnevate süvendite vahel on oluline laadida võrdne maht 1x laadimispuhvrit igasse tühja kaevu. See ettevaatusabinõu aitab vältida proovide levimist naaberradadele, mis võib juhtuda kaevu tühjaks jätmisel.

Enne proovide laadimist alustage alati molekulmassi markeri lisamisega ühte süvendisse. See võimaldab pärast elektroforeesi hõlpsalt tuvastada valkude suurust.

1

Pinge juhtimine: kiiruse ja eraldusvõime tasakaalustamine

Elektroforeesi ajal rakendatav pinge mõjutab otseselt nii proovide geelist läbimise kiirust kui ka eraldumise eraldusvõimet. SDS-PAGE puhul on soovitatav alustada madala pingega umbes 80 V. See esialgne madalpinge võimaldab proovidel aeglaselt ja ühtlaselt migreeruda, kontsentreerides need eraldusgeeli sisenedes teravaks ribaks.

Kui proovid on täielikult eraldusgeeli sisenenud, saab pinget tõsta 120 V-ni. See kõrgem pinge kiirendab migratsiooni, tagades valkude tõhusa eraldamise vastavalt nende molekulmassile. Oluline on jälgida bromofenoolsinise värvaine rinde edenemist, mis näitab elektroforeesi lõpetamist. 10-12% kontsentratsiooniga geelide puhul piisab tavaliselt 80-90 minutist; 15% geelide puhul võib aga tekkida vajadus kasutusaega veidi pikendada.

Aja juhtimine: teadmine, millal peatuda

Ajastus on geelelektroforeesi teine ​​kriitiline tegur. Liiga pikk või lühike geeli kasutamine võib viia ebaoptimaalse eraldumiseni. Bromofenoolsinise värvaine migreerumine on kasulik näitaja: kui see jõuab geeli põhja, on tavaliselt aeg jooksmine peatada. Tavaliste geelide, näiteks 10-12%, elektroforeesi kestus on tavaliselt piisav umbes 80-90 minutit. Suurema protsendi geelide puhul, näiteks 15%, tuleks tööaega pikendada, et tagada valkude täielik eraldumine.

Puhvrihaldus: puhvrite taaskasutamine ja ettevalmistamine

Elektroforeesipuhvrit saab uuesti kasutada 1-2 korda, olenevalt teie labori eritingimustest. Kuid optimaalsete tulemuste saavutamiseks on soovitatav valmistada värske 10-kordne puhver ja lahjendada see vahetult enne kasutamist. See tagab, et puhver säilitab oma efektiivsuse, mis annab usaldusväärsemad elektroforeesi tulemused.

2

Pekingi Liuyi Biotechnology geelelektroforeesi tooted

Kontrollides hoolikalt proovi mahtu, pinget ja elektroforeesi aega, saate oluliselt parandada oma geelelektroforeesi tulemuste täpsust ja reprodutseeritavust. Nende parimate tavade rakendamine oma laboritöös aitab teil saavutada selgemaid ja eristuvamaid ribasid, mis toob kaasa paremad andmed järgnevateks analüüsideks.

Kui teil on rohkem häid meetodeid geelelektroforeesi katse optimeerimiseks, võtke meiega ühendust!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) on rohkem kui 50 aastat spetsialiseerunud elektroforeesiinstrumentide tootmisele koos meie professionaalse tehnilise meeskonna ning uurimis- ja arenduskeskusega. Meil on usaldusväärne ja terviklik tootmisliin projekteerimisest ülevaatuseni ja ladu ning turundustugi. Meie peamised tooted on elektroforeesielement (paak/kamber), elektroforeesi toiteallikas, sinine LED-transilluminaator, UV-transilluminaator, geelpildi- ja analüüsisüsteem jne. Tarnime ka laboriseadmeid, nagu PCR-i instrument, keerismikser ja labori tsentrifuug.

Kui teil on meie toodete ostuplaan, võtke meiega kindlasti ühendust. Võite saata meile sõnumi e-posti aadressile[e-postiga kaitstud]või[e-postiga kaitstud], või helistage meile numbril +86 15810650221 või lisage Whatsapp +86 15810650221 või Wechat: 15810650221.

Whatsappis või WeChatis lisamiseks skannige QR-kood.

2


Postitusaeg: 20. august 2024